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维持基因组完整性对于正常的细胞功能至关重要◈◈★◈。因此◈◈★◈，生物体通过识别DNA损伤位点◈◈★◈，激活一系列生化通路◈◈★◈，协调DNA复制与转录西部世界第三集下载◈◈★◈，使损伤DNA得以修复◈◈★◈，维持机体的稳定◈◈★◈。DNA损伤修复的研究有助于了解基因突变的机制◈◈★◈、衰老和癌变的原因贝斯特全球最奢华◈◈★◈，还可应用于环境致癌因子的检测贝斯特全球最奢华◈◈★◈。表征调控DSB修复的因素和途径对于了解致癌事件期间的诱变过程和开发适当的癌症疗法非常重要西部世界第三集下载◈◈★◈。
真核生物主要通过两种途径修复◈◈★◈：同源重组（HR）和非同源末端连接（NHEJ）◈◈★◈。测量途径的典型方法是盒式报告基因检测◈◈★◈。
同源重组（HR）检测系统由两个突变的非功能性荧光蛋白SceGFP和iGFP组成◈◈★◈，SceGFP和iGFP之间由药物筛选标记嘌呤分离开◈◈★◈。
SceGFP作为重组报告基因◈◈★◈，序列中插入一个I-Sce I位点使其失活西部世界第三集下载◈◈★◈，当加入I-Sce I核酸内切酶时可以引起SceGFP断裂◈◈★◈，刺激修复途径激活◈◈★◈，以iGFP为供体片段的同源重组修复事件修复断裂的SceGFP进而恢复荧光蛋白的表达◈◈★◈。
启动子通过一个puro基因与GFP编码盒分离◈◈★◈，puro基因两侧是两个具有相同方向的I-SceI位点◈◈★◈，当加入I-Sce I核酸内切酶时◈◈★◈，puro基因被切除◈◈★◈，NHEJ修复两个I-SceI诱导的DSB◈◈★◈，I-SceI识别位点之间的末端连接可恢复GFP+表达◈◈★◈。
为研究NORAD如何影响辐射应激期间ESCC细胞的DNA损伤修复反应◈◈★◈，在KYSE-150和TE-1细胞中敲低了NORAD◈◈★◈。将重组DR-GFP质粒转染到有和没有NORAD敲低的细胞中西部世界第三集下载西部世界第三集下载◈◈★◈，以确定NORAD是否调节DNA修复◈◈★◈。通过将I-SceI质粒瞬时转染到细胞中来诱导DNA双链断裂西部世界第三集下载◈◈★◈。流式细胞术测定显示NORAD敲低导致DSB的同源重组修复减少3-4倍贝斯特全球最奢华◈◈★◈。基于流式细胞术的细胞凋亡测定表明西部世界第三集下载西部世界第三集下载◈◈★◈，NORAD敲低提高了照射细胞的凋亡率贝斯特全球最奢华◈◈★◈。证实了NORAD通过调节DNA损伤修复过程来调节ESCC辐射敏感性◈◈★◈。
首先◈◈★◈，将DNA DSBs报告质粒转染到细胞中贝斯特全球最奢华◈◈★◈，筛选稳定表达DR-GFP的细胞◈◈★◈，并瞬时转染另一个表达I-Sce I核酸内切酶的质粒◈◈★◈。
NHEJ非同源末端修复的EJ5GFP质粒（EJ5-GFP检测多类NHEJ事件◈◈★◈，因此可以被认为是总NHEJ的测定）◈◈★◈；
